随着高通量测序技术的普及与基因组信息爆炸式的增长,解析基因与基因组孕藏的功能信息成为我们了解生命密码的必需步骤。功能基因研究是破解基因组信息这部天书的重要手段之一,而功能基因的研究离不开载体的构建与转基因方法。传统的载体构建耗时耗力,伴随着烦琐的酶切与连接手段,成功地构建一个用于植物转化的载体往往需要几天甚至几个星期的时间,有时操作人员因为找不到适合的酶切位点而头痛不已,这些都是限制功能基因研究的瓶颈问题。

为了克服以上问题, 中国科学院昆明植物研究所胡向阳研究组的王春涛博士与博士生孔翔祥等人员,基于TA克隆技术建立了一套全新的基因连接与克隆系统, 这一套系统完全克服了传统克隆过程中上述难题,而且具有操作简易、高效、稳定等特点。研究组成员将这套系统成功地运用到水稻与拟南芥的原生质转化与蛋白细胞定位方面,以及拟南芥稳定转化等功能基因研究。一系列的证据表明利用这套系统构建的载体,目标基因可以稳定高效地在拟南芥中表达,获得的转基因材料可以用于下一步的生理生化与功能分析。

上述研究结果以“A series of TA-based and zero-background vectors for plant functional genomics”为题发表在《公共科学图书馆－综合（PLoS ONE）》上。论文链接http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0059576。

利用TAT克隆构建瞬时表达载体 

瞬时表达载体在拟南芥与水稻原生质中表达